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1.
Rev. biol. trop ; 71(1)dic. 2023.
Article in Spanish | SaludCR, LILACS | ID: biblio-1514965

ABSTRACT

Introducción: La gran diversidad de especies maderables tropicales demanda el desarrollo de nuevas tecnologías de identificación con base en sus patrones o características anatómicas. La aplicación de redes neuronales convolucionales (CNN) para el reconocimiento de especies maderables tropicales se ha incrementado en los últimos años por sus resultados prometedores. Objetivo: Evaluamos la calidad de las imágenes macroscópicas con tres herramientas de corte para mejorar la visualización y distinción de las características anatómicas en el entrenamiento del modelo CNN. Métodos: Recolectamos las muestras entre el 2020 y 2021 en áreas de explotación forestal y aserraderos de Selva Central, Perú. Luego, las dimensionamos y, previo a la identificación botánica y anatómica, las cortamos en secciones transversales. Generamos una base de datos de imágenes macroscópicas de la sección transversal de la madera, a través del corte, con tres herramientas para ver su rendimiento en el laboratorio, campo y puesto de control. Resultados: Usamos tres herramientas de corte para obtener una alta calidad de imágenes transversales de la madera; obtuvimos 3 750 imágenes macroscópicas con un microscopio portátil que corresponden a 25 especies maderables. El cuchillo ''Tramontina'' es duradero, pero pierde el filo con facilidad y se necesita una herramienta para afilar, el cúter retráctil ''Pretul'' es adecuado para madera suave y dura en muestras pequeñas de laboratorio; el cuchillo ''Ubermann'' es apropiado para el campo, laboratorio y puesto de control, porque tiene una envoltura duradera y láminas intercambiables en caso de pérdida de filo. Conclusiones: La calidad de las imágenes es decisiva en la clasificación de especies maderables, porque permite una mejor visualización y distinción de las características anatómicas en el entrenamiento con los modelos de red neuronal convolucional EfficientNet B0 y Custom Vision, lo cual se evidenció en las métricas de precisión.


Introduction: The great diversity of tropical timber species demands the development of new technologies capable of identifying them based on their patterns or anatomical characteristics. The application of convolutional neural networks (CNN) for the recognition of tropical timber species has increased in recent years due to the promising results of CNNs. Objective: To evaluate the quality of macroscopic images with three cutting tools to improve the visualization and distinction of anatomical features in the CNN model training. Methods: Samples were collected from 2020 to 2021 in areas of logging and sawmills in the Central Jungle, Peru. They were later sized and, after botanical and anatomical identification, cut in cross sections. A database of macroscopic images of the cross-section of wood was generated through cutting with three different tools and observing its performance in the laboratory, field, and checkpoint. Results: Using three cutting tools, we obtained high quality images of the cross section of wood; 3 750 macroscopic images were obtained with a portable microscope and correspond to 25 timber species. We found the ''Tramontina'' knife to be durable, however, it loses its edge easily and requires a sharpening tool, the ''Pretul'' retractable cutter is suitable for cutting soft and hard wood in small laboratory samples and finally the ''Ubermann'' knife is suitable for use in the field, laboratory, and checkpoint, because it has a durable sheath and interchangeable blades in case of dullness. Conclusion: The quality of the images is decisive in the classification of timber species, because it allows a better visualization and distinction of the anatomical characteristics in training with the EfficientNet B0 and Custom Vision convolutional neural network models, which was evidenced in the precision metrics.


Subject(s)
Wood/analysis , Microscopy, Electron , Tropical Ecosystem , Peru , Machine Learning
2.
Int. j. morphol ; 41(5): 1492-1500, oct. 2023. ilus, tab
Article in English | LILACS | ID: biblio-1521050

ABSTRACT

SUMMARY: The aim of the present work was to study the closer effect of clomiphene citrate on the ultrastructure of the testis of adult albino rats to provide a basis for optimizing this drug in the treatment of male infertility. The testes were removed from both groups under anesthesia and then prepared for examination by light using hematoxylin and eosin stains and a transmission electron microscope. Semithin sections were cut into 1 µm thick sections, stained with toluidine blue, and examined by light microscopy for a survey. The desired areas were placed in the center, and other areas were trimmed. Primary spermatocytes showed marked nuclear changes (pyknosis), and their nuclear membranes were ill-defined and disrupted. The cytoplasm showed widespread degeneration of mitochondria and lysosomes and focal degeneration of the rough endoplasmic reticulum compared with the control group. The spermatids were pale, and the two phases of spermatogenesis were distinctly identifiable in the control group but were confused in the treated group. Some spermatids had interrupted nuclear membranes, also containing degenerated mitochondria, focal fragmentation of rough endoplasmic reticulum, and free ribosomes. Spermatozoa in the treated group appeared deformed compared to the control, where they had deformed head caps. Leydig cells of the treated group have an irregularly shaped nucleus, with focal chromatin aggregation and peripheral chromatin condensation on the inner surface of the nuclear membrane. The observations of the present work indicate a possible causal relationship between testicular affection and ingestion of clomiphene citrate, which can be avoided by close medical observations using ultrasonography, semen analysis, or testicular biopsy to detect early malignant changes. Furthermore, the drug should not be used for more than three to six cycles and should be stopped for at least three cycles before reuse. When clomiphene citrate is ineffective in the treatment of male infertility, human menopausal gonadotropin (hMG) administration is typically selected. However, high-dose hMG therapy is associated with a variety of adverse effects. In this work, we report the success of a modified clomiphene citrate regimen in increasing sperm count without any hazards to the testicular tissue.


El objetivo del trabajo fue estudiar el efecto del citrato de clomifeno sobre la estructura de los testículos de la rata albina adulta, con la finalidad de determinar la mejor manera de utilizar este fármaco en el tratamiento de la infertilidad masculina. Los testículos se extrajeron bajo anestesia y para su análisis a través de microscopio de luz se tiñeron con HE. Además, las muestras fueron preparadas para su examen con microscopía electrónica de transmisión. Por otra parte, se cortaron secciones semifinas de 1 µm de espesor, se tiñeron con azul de toluidina y se examinaron mediante microscopía óptica. Los espermatocitos primarios mostraron cambios nucleares marcados (picnosis) y sus membranas nucleares estaban mal definidas y alteradas. En el grupo experimental las células presentaban el citoplasma con degeneración generalizada de las mitocondrias y de los lisosomas y una degeneración focal del retículo endoplásmico rugoso en comparación con el grupo control. Las espermátidas estaban pálidas y las dos fases de la espermatogénesis eran claramente identificables en el grupo control, pero se confundían en el grupo tratado. Algunas espermátidas tenían membranas nucleares interrumpidas, y también contenían mitocondrias degeneradas, fragmentación focal del retículo endoplásmico rugoso y ribosomas libres. Los espermatozoides del grupo tratado se presentaban deformados en comparación con el control. Las células de Leydig del grupo tratado presentaban un núcleo de forma irregular, con agregación focal de cromatina y condensación de cromatina periférica en la superficie interna de la membrana nuclear. Las observaciones del presente trabajo indican una posible relación causal entre la afección testicular y la ingestión de citrato de clomifeno, que puede evitarse mediante observaciones médicas minuciosas a través de ecografía, análisis de semen o biopsia testicular para detectar cambios malignos tempranos. Además, el medicamento no debiera ser usado durante más de tres a seis ciclos y debe suspenderse durante al menos tres ciclos antes de volver a usarlo. Cuando el citrato de clomifeno es ineficaz en el tratamiento de la infertilidad masculina, normalmente se selecciona la administración de gonadotropina menopáusica humana (hMG). Sin embargo, la terapia con hMG en dosis altas se asocia con una variedad de efectos adversos. En este trabajo, informamos el éxito de un régimen modificado con citrato de clomifeno para aumentar el recuento de espermatozoides sin riesgo para el tejido testicular.


Subject(s)
Animals , Male , Rats , Testis/drug effects , Clomiphene/pharmacology , Spermatogenesis/drug effects , Testis/ultrastructure , Microscopy, Electron
3.
Respirar (Ciudad Autón. B. Aires) ; 15(3): [163-171], sept. 2023.
Article in Spanish | LILACS, UNISALUD, BINACIS | ID: biblio-1510792

ABSTRACT

Ejecutar procesos efectivos de búsqueda de casos de tuberculosis es crucial para acele-rar el paso hacia su eliminación. El empeoramiento de las condiciones económicas mun-diales y nacionales no nos permite aplicar extensivamente las tecnologías rápidas mo-leculares idóneas de diagnóstico. Consideramos sensato entonces aplicar algoritmos alternativos que satisfagan las necesidades nacionales presentes hasta que las condi-ciones permitan la cobertura completa de las tecnologías moleculares recomendadas. Sugerimos introducir la radiografía digital para todos los algoritmos, utilizar mejor la microscopía de fluorescencia LED y la óptica convencional ya probadas. En conclusión, es preciso que este enfoque de trabajo, que procura optimizar la efectividad y eficiencia del programa, se introduzca en la práctica cotidiana hasta que lo idóneo sea permisible


Executing effective tuberculosis case-finding processes is crucial to accelerate the path towards elimination of the disease. The worsening of global and national economic conditions do not allow us to extensively apply rapid molecular diagnostic technolo-gies. We consider it sensible and necessary to apply alternative algorithms that meet the current national needs, until conditions allow full coverage of the recommended molecular technologies. We suggest introducing digital X-rays for all algorithms, bet-ter use of LED fluorescence microscopy and conventional optics already appropriate-ly tested. In conclusion, it is necessary that this approach that seeks to optimize the effectiveness and efficiency of the Cuban program be introduced into daily practice until the ideal is permissible


Subject(s)
Humans , Tuberculosis/diagnosis , Public Health , Economic Factors , Microscopy, Electron , Radiography, Thoracic , Radiographic Image Enhancement , Cuba , Molecular Diagnostic Techniques/methods
4.
Int. j. morphol ; 41(2): 539-547, abr. 2023. ilus, tab
Article in English | LILACS | ID: biblio-1440313

ABSTRACT

SUMMARY: A great deal of attention of air pollution on respiratory health is increasing, particularly in relation to haze days. It is that exposure to cigarette smoke augments the toxicity of common air contaminants, thereby increasing the complexity of respiratory diseases. Although there are various mechanisms involved to respiratory diseases caused or worsen by cigarette smoking, in which the role of AQPs in the lung with regard to fluid homeostasis still remains elusive. In this paper, we copied the rat models based on smoke generator, and investigated the morphological changes of mucosa and related functions depending on the balance of lining liquid of alveoli via AQPs expression. Compared with normal group, weak labelling of AQP1 and AQP5 protein abundance were clearly detected in the corresponding part of smoke exposure groups compared with normal group. Hence, it is suggested that the contribution of AQPs in the lung is diminished, thereby causing perturbed balancing between resorptive and secretory fluid homeostasis under cigarette smoking.


Cada vez se presta más atención a la contaminación del aire en la salud respiratoria, particularmente, en relación con los días de neblina. En consecuencia la exposición al humo del cigarrillo aumenta la toxicidad de los contaminantes comunes del aire, lo que además aumenta la complejidad de las enfermedades respiratorias. Aunque existen varios mecanismos involucrados en las enfermedades respiratorias causadas o empeoradas por el tabaquismo, en las que el papel de las AQP en el pulmón respecto a la homeostasis de líquidos sigue siendo difícil de alcanzar. En este artículo, copiamos los modelos de rata basados en el generador de humo e investigamos los cambios morfológicos de la mucosa y las funciones relacionadas según el equilibrio del líquido de revestimiento de los alvéolos a través de la expresión de AQP. En comparación con el grupo normal, se detectó claramente un etiquetado débil de la abundancia de proteínas AQP1 y AQP5 en la parte correspondiente de los grupos de exposición al humo en comparación con el grupo control. Por lo tanto, se sugiere que la contribución de las AQP en el pulmón está disminuida, provocando así un equilibrio perturbado entre la homeostasis del líquido secretor y de reabsorción bajo el hábito de fumar cigarrillos.


Subject(s)
Animals , Rats , Respiratory System/pathology , Cigarette Smoking/adverse effects , Respiratory System/drug effects , Body Fluids/metabolism , Immunohistochemistry , Microscopy, Electron , Rats, Sprague-Dawley , Aquaporins/metabolism , Homeostasis , Lung/drug effects , Lung/pathology
6.
Int. j. morphol ; 40(3): 808-816, jun. 2022. ilus
Article in English | LILACS | ID: biblio-1385645

ABSTRACT

SUMMARY: Diabetic nephropathy (DN) is the most common complication of diabetes. Several studies have been done in a trial to protect against this problem at the ultrastructure level. This study investigates the protective effect of oral administration of Acacia senegal (AS) against the development of DN. Sixty male albino rats were randomly divided into six groups: control, Acacia senegal control, Diabetic untreated, diabetic insulin-treated, Diabetic AS treated, and Diabetic insulin and AS combined treated groups. Plasma glucose, HbA1c, serum Albumin, creatinine, urine creatinine was measured using specific kits. Determinations of creatinine clearance and blood pressure were done. The renal tissues of both kidneys were prepared to investigate under both light (LM) and electron microscope (EM). Ultrastructure examination of renal rats tissue of diabetic untreated rats showed the destruction of the glomerular basement membrane and endothelial cells together with hemorrhage in glomerular capsules (Bowman's capsules). On the other side, both LM and EM revealed improving the endothelial cells and the other glomerular capsules structures, especially with the combined treated group, which confirmed the improvement of the biochemical investigation in the study. In conclusion, from the present study, using the oral AS together with SC insulin could be protected against the development of DN.


RESUMEN: La nefropatía diabética (ND) es la complicación más común de la diabetes. Se han realizado varios estudios de ensayo para abordar esta dificultad a nivel de ultraestructura. Este estudio investiga el efecto protector de la administración oral de Acacia senegal (AS) contra el desarrollo de la ND. Se dividieron sesenta ratas albinas machos aleatoriamente en seis grupos: control, control de Acacia senegal, diabéticos no tratados, diabéticos tratados con insulina, diabéticos tratados con AS y grupos tratados con compuesto de insulina diabética + AS. Se midieron utilizando kits específicos, glucosa plasmática, HbA1c, albúmina sérica, creatinina en sangre y en orina. Se registraron la creatinina y la presión arterial. Los tejidos renales de ambos riñones se prepararon para investigar tanto con microscopio óptico (MO) como electrónico (ME). El examen de la ultraestructura del tejido renal de ratas diabéticas no tratadas mostró la destrucción de la membrana basal glomerular y las células endoteliales junto con hemorragia en las cápsulas glomerulares (cápsulas de Bowman). Por otro lado, tanto MO como ME revelaron una mejora de las células endoteliales y las estructuras capsulares glomerulares, en el grupo tratado con el compuesto, lo que confirmó la mejora de la investigación bioquímica. En conclusión, el uso de AS oral en combinación con insulina podría proteger contra el desarrollo de ND.


Subject(s)
Animals , Rats , Diabetic Nephropathies/prevention & control , Acacia , Gum Arabic/administration & dosage , Kidney/drug effects , Microscopy, Electron , Biomarkers , Administration, Oral , Rats, Sprague-Dawley , Disease Models, Animal , Kidney/ultrastructure
7.
Int. j. morphol ; 40(3): 697-705, jun. 2022. ilus, tab
Article in English | LILACS | ID: biblio-1385688

ABSTRACT

SUMMARY: An association between certain food additives and chronic diseases is reported. Current study determined whether administering toxic doses of the food additive monosodium glutamate (MSG) into rats can induce aortopathy in association with the oxidative stress and inflammatory biomarkers upregulation and whether the effects of MSG overdose can be inhibited by vitamin E. MSG at a dose of (4 mg/kg; orally) that exceeds the average human daily consumption by 1000x was administered daily for 7 days to the rats in the model group. Whereas, rats treated with vitamin E were divided into two groups and given daily doses of MSG plus 100 mg/ kg vitamin E or MSG plus 300 mg/kg vitamin E. On the eighth day, all rats were culled. Using light and electron microscopy examinations, a profound aortic injury in the model group was observed demonstrated by damaged endothelial layer, degenerated smooth muscle cells (SMC) with vacuoles and condensed nuclei, vacuolated cytoplasm, disrupted plasma membrane, interrupted internal elastic lamina, clumped chromatin, and damaged actin and myosin filaments. Vitamin E significantly protected aorta tissue and cells as well as inhibited MSG-induced tissue malondialdehyde (MDA), interleukin-6 (IL-6), and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α). The highest used vitamin E dosage was more effective. Additionally, a significant correlation was observed between the aortic injury degree and tissue MDA, TNF-α, IL-6, and superoxide dismutase (SOD) levels (p=0.001). Vitamin E effectively protects against aortopathy induced by toxic doses of MSG in rats and inhibits oxidative stress and inflammation.


RESUMEN: Se reporta una asociación entre ciertos aditivos alimentarios y enfermedades crónicas. El objetivo de este estudio fue determinar si la administración de dosis tóxicas del aditivo alimentario glutamato monosódico (MSG) en ratas puede inducir aortopatía en asociación con el estrés oxidativo y la regulación positiva de los biomarcadores inflamatorios y si el efecto de una sobredosis de MSG se puede inhibir con vitamina E. Se administró MSG diariamente durante 7 días una dosis de (4 g/kg; por vía oral) que excede el consumo diario humano promedio, en 1000x a las ratas del grupo modelo. Mientras que las ratas tratadas con vitamina E se dividieron en dos grupos y se administraron dosis diarias de MSG más 100 mg/kg de vitamina E o MSG más 300 mg/kg de vitamina E. Todas las ratas fueron sacrificadas en el octavo día. Usando exámenes de microscopía óptica y electrónica, se observó una lesión aórtica profunda en el grupo modelo demostrada por una capa endotelial dañada, células musculares lisas degeneradas (SMC) con vacuolas y núcleos condensados, citoplasma vacuolado, membrana plasmática rota, lámina elástica interna interrumpida, cromatina agrupada y filamentos de actina y miosina dañados. La vitamina E protegió significativamente el tejido y las células de la aorta, además de inhibir el malondialdehído tisular (MDA) inducido por MSG, la interleucina-6 (IL-6) y el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α). La dosis más alta de vitamina E utilizada fue más efectiva. Además, se observó una correlación significativa entre el grado de lesión aórtica y los niveles tisulares de MDA, TNF-α, IL-6 y superóxido dismutasa (SOD) (p=0,001). La vitamina E efectivamente protege contra la aortopatía inducida por dosis tóxicas de MSG en ratas e inhibe el estrés oxidativo y la inflamación.


Subject(s)
Animals , Rats , Aorta/drug effects , Aortic Diseases/chemically induced , Sodium Glutamate/toxicity , Vitamin E/pharmacology , Aorta/pathology , Sodium Glutamate/administration & dosage , Vitamin E/administration & dosage , Microscopy, Electron , Interleukin-6/antagonists & inhibitors , Tumor Necrosis Factor-alpha/antagonists & inhibitors , Rats, Sprague-Dawley , Oxidative Stress/drug effects , Disease Models, Animal , Malondialdehyde/antagonists & inhibitors
9.
Int. j. morphol ; 40(4): 981-989, 2022. ilus
Article in English | LILACS | ID: biblio-1405258

ABSTRACT

SUMMARY: Trophoblasts perform different functions depending on their location. This study aimed to obtain structural clues about the functions of villous and extravillous trophoblasts by using light and electron microscopy. Term placenta samples were obtained from 10 healthy pregnant women following cesarean sections. Frozen sections were stained with hematoxylin-eosin, semi- thin sections were stained with toluidine blue and examined with a light microscope, while thin sections were contrasted using uranyl acetate-lead citrate and evaluated under an electron microscope. Fine structural features of villous trophoblasts overlapped some villous stromal cells. In addition to the usual appearance of mature capillaries in villous stroma, we demonstrated and reported maturational stages of angiogenetic sprouts in term placenta. Extravillous trophoblasts were classified according to their location: fibrinoid, chorion, trophoblastic, column, maternal vascular endothelium, or decidua. All of these trophoblasts shared some ultrastructural features but also were distinct from each other. In decidua, it was noted that the endothelial lining of some vessels was invaded by a few endovascular trophoblasts with irregular microvilli. These cells shared some ultrastructural properties with both villous trophoblasts and stromal cells. Examination showed that angiogenesis was still present in term placentas and that trophoblasts, endothelial and stromal cells have very similar properties ultrastructurally, suggesting they represent transformational forms.


RESUMEN: Los trofoblastos dependiendo de su ubicación realizan diferentes funciones. Este estudio tuvo como objetivo obtener pistas estructurales sobre las funciones de los trofoblastos vellosos y extravellosos mediante el uso de microscopía óptica y electrónica. Se obtuvieron muestras de placenta a término de 10 mujeres embarazadas sanas después de cesáreas. Las secciones congeladas se tiñeron con hematoxilina-eosina, las secciones semidelgadas se tiñeron con azul de toluidina y se examinaron con un microscopio óptico, mientras que las secciones delgadas se contrastaron con acetato de uranilo-citrato de plomo y se evaluaron con un microscopio electrónico. Las finas características estructurales de los trofoblastos vellosos se superponen a algunas células estromales vellosas. Además de la apariencia habitual de capilares maduros en el estroma velloso, demostramos e informamos etapas de maduración de brotes angiogenéticos en la placenta a término. Los trofoblastos extravellosos se clasificaron según su localización: fibrinoide, corion, trofoblástico, columna, endotelio vascular materno o decidua. Todos estos trofoblastos compartían algunas características ultraestructurales, pero también eran distintos entre sí. En decidua se observó que el revestimiento endotelial de algunos vasos estaba invadido por unos pocos trofoblastos endovasculares con microvellosidades irregulares. Estas células compartían algunas propiedades ultraestructurales tanto con los trofoblastos vellosos como con las células del estroma. El examen mostró que la angiogénesis todavía estaba presente en las placentas a término y que los trofoblastos, las células endoteliales y estromales tienen propiedades ultraestructurales muy similares, lo que sugiere que representan formas de transformación.


Subject(s)
Humans , Female , Placenta/ultrastructure , Trophoblasts/ultrastructure , Neovascularization, Physiologic , Microscopy, Electron
10.
Int. j. morphol ; 40(4): 895-901, 2022. ilus, tab, graf
Article in English | LILACS | ID: biblio-1405264

ABSTRACT

SUMMARY: This research was to examine the histological and ultrastructural characteristics of prepuce samples, as well as vimentin and S100 protein localization and statistical analysis. Urologists have long struggled with the prepuce, which is used to treat a variety of urethral problems. Skin biopsies were collected from the prepuce at the moment of circumcision and processed for light microscopy, electron microscope examination, immunohistochemical techniques, and statistical analysis in a total of six boys. Histologically, the prepuce epidermis displayed focal spiky ridges, which are saw-toothed interspersed with sulci, slight hyperpigmentation, looser connective tissue and plentiful vascular components. Immunohistochemically, the existence of melanocytes and Langerhans cells in the epidermis, as well as smooth muscles in the dermis, was stained positively for vimentin. Also, there was a positive reactivity of the Langerhans cells in the epidermis and around Meissner's corpuscles in the dermis for S100 protein staining. Ultrastructurally, the prepuce's intercellular gaps were widened, melanocytes rested on a folded basement membrane, and desmosomal content was reduced, with a prominent active euchromatic nucleus. Cytoplasmic projections were distended and elongated, and the interstitial blood vessels were surrounded by endothelial cells and rested on a basement membrane. There were also minimal collagen fibers in the interstitium. The prepuce's histological and ultrastructural features, as well as immunohistological studies using vimentin and S100 protein as intermediate filaments and statistical analysis, all demonstrated that it is a useful scientific resource.


RESUMEN: El presente trabajo de investigación se realizó para examinar las características histológicas y ultraestructurales de las muestras de prepucio, así como la localización y el análisis estadístico de la vimentina y la proteína S100. Los urólogos han intentado trabajar durante mucho tiempo con el prepucio, que se usa para tratar una variedad de problemas uretrales. Se recolectaron biopsias de piel del prepucio de seis niños en el momento de la circuncisión y se procesaron para microscopía óptica, examen con microscopio electrónico, técnicas inmunohistoquímicas y análisis estadístico. Histológicamente, la epidermis del prepucio mostraba crestas puntiagudas focales, intercaladas con surcos, hiperpigmentación leve, tejido conectivo más laxo y abundantes componentes vasculares. Inmunohistoquímicamente, la existencia de melanocitos y células dendríticas epidérmicas (células de Langerhans), así como músculo liso en la dermis, se tiñeron positivamente para vimentina. Además, hubo una reactividad positiva de las células dendríticas epidérmicas en la epidermis y alrededor de los corpúsculos del tacto (de Meissner) en la dermis para la tinción de la proteína S100. Ultraestructuralmente, los espacios intercelulares del prepucio se ensancharon, los melanocitos descansaban sobre una membrana basal plegada y el contenido desmosómico se redujo, con un núcleo eucromático activo prominente. Las proyecciones citoplasmáticas estaban distendidas y alargadas, y los vasos sanguíneos intersticiales estaban rodeados por células endoteliales y descansaban sobre una membrana basal. También había fibras de colágeno mínimas en el intersticio. Las características histológicas y ultraestructurales del prepucio, así como los estudios inmunohistológicos utilizando vimentina y proteína S100 como filamentos intermedios y el análisis estadístico, demostraron que es un recurso científico útil.


Subject(s)
Humans , Male , Foreskin/anatomy & histology , Vimentin , Immunohistochemistry , Microscopy, Electron , S100 Proteins , Foreskin/metabolism , Foreskin/ultrastructure
11.
Int. j. morphol ; 40(5): 1152-1164, 2022. ilus, tab
Article in English | LILACS | ID: biblio-1405284

ABSTRACT

SUMMARY: Coreopsis tinctoria Nutt. (C. tinctoria Nutt.) can protect diabetic kidneys, but the mechanisms are unclear. This work is to investigate the potential mechanisms of C. tinctoria Nutt. in the treatment of diabetic nephropathy based on network pharmacology analysis of its active ingredients. Twelve small molecular compounds of C. tinctoria Nutt. and targets related to diabetic nephropathy were docked by Discovery Studio 3.0. DAVID database was used for GO enrichment and KEGG pathway analysis. Cytoscape 3.6.1 was used to construct active ingredient-target network. Cell viability was detected with MTT. Glucose consumption was analyzed with glucose oxidase method. Protein expression was measured with Western blot and immunofluorescence. Electron microscopy observed autophagosomes. The core active ingredients of C. tinctoria Nutt. included heriguard, flavanomarein, maritimein, and marein. Twenty-one core targets of the 43 potential targets were PYGM, TLR2, RAF1, PRKAA2, GPR119, INS, CSF2, TNF, IAPP, AKR1B1, GSK3B, SYK, NFKB2, ESR2, CDK2, FGFR1, HTRA1, AMY2A, CAMK4, GCK, and ABL2. These 21 core targets were significantly enriched in 50 signaling pathways. Thirty- four signaling pathways were closely related to diabetic nephropathy, of which the top pathways were PI3K/AKT, insulin, and mTOR, and insulin resistance. The enriched GO terms included biological processes of protein phosphorylation, and the positive regulation of PI3K signaling and cytokine secretion; cellular components of cytosol, extracellular region, and extracellular space; and molecular function of protein kinase activity, ATP binding, and non-membrane spanning protein tyrosine kinase activity. In vitro experiments found that marein increased the expression of phosphorylated AKT/AKT in human renal glomerular endothelial cells of an insulin resistance model induced by high glucose, as well as increased and decreased, respectively, the levels of the microtubule-associated proteins, LC3 and P62. C. tinctoria Nutt. has many active ingredients, with main ingredients of heriguard, flavanomarein, maritimein, and marein, and may exert anti-diabetic nephropathy effect through various signaling pathways and targets.


RESUMEN: Coreopsis tinctoria Nutt. (C. tinctoria Nutt.) puede proteger riñones diabéticos, sin embargo los mecanismos son desconocidos. Este trabajo se realizó para investigar los potenciales mecanismos de C. tinctoria Nutt. en el tratamiento de la nefropatía diabética basado en el análisis de farmacología en red de sus principios activos. Doce compuestos moleculares pequeños de C. tinctoria Nutt. y los objetivos relacionados con la nefropatía diabética fueron acoplados por Discovery Studio 3.0. La base de datos DAVID se utilizó para el enriquecimiento GO y el análisis de la vía KEGG. Se usó Cytoscape 3.6.1 para construir una red de ingrediente-objetivo activa. La viabili- dad celular se detectó mediante MTT. El consumo de glucosa se analizó con el método de glucosa oxidasa. La expresión proteica fue determinada mediante Western blot e inmunofluorescencia. En la microscopía electrónica se observó autofagosomas. Los principales ingredientes activos de C. tinctoria Nutt. incluyeron heriguard, flavanomarein, maritimin y marein. Veintiún de los 43 objetivos potenciales fueron PYGM, TLR2, RAF1, PRKAA2, GPR119, INS, CSF2, TNF, IAPP, AKR1B1, GSK3B, SYK, NFKB2, ESR2, CDK2, FGFR1, HTRA1, AMY2A, CAMK4, GCK y ABL2. Estos 21 objetivos principales se enriquecieron significativamente en 50 vías de señalización. Treinta y cuatro vías de señalización estuvieron estrechamente relacionadas con la nefropatía diabética, de las cuales las principales vías fueron PI3K/ AKT, insulina y mTOR, y resistencia a la insulina. Los términos GO enriquecidos incluyeron procesos biológicos de fosforilación proteica, la regulación positiva de la señalización de PI3K y la secreción de citoquinas; componentes celulares del citosol, región extracelular y espacio extracelular; y la función molecular de la actividad de la proteína quinasa, la unión de ATP y la actividad de la proteína tirosina quinasa que no se extiende por la membrana. Los experimentos in vitro encontraron que la mareína aumentaba la expresión de AKT/AKT fosforilada en células endoteliales glomerulares renales humanas en un modelo de resistencia a la insulina inducida por niveles elevados de glucosa, así como aumentaron y disminuyeron respectivamente, los niveles de las proteínas asociadas a los microtúbulos, LC3 y P62. C. tinctoria Nutt. tiene muchos principios activos, con ingredientes principales de heriguard, flavanomarein, maritimain y marein, y puede ejercer un efecto de nefropatía antidiabética a través de distintass vías de señalización y objetivos.


Subject(s)
Coreopsis/chemistry , Diabetic Nephropathies , Network Pharmacology , Microscopy, Electron , Blotting, Western , Fluorescent Antibody Technique , Chalcones
12.
São Paulo; s.n; s.n; 2022. 101 p. tab, graf.
Thesis in Portuguese | LILACS | ID: biblio-1437639

ABSTRACT

A Leucemia Linfoide Aguda (LLA) é um câncer de maior incidência em crianças, e tem a Lasparaginase (ASNase) como fármaco amplamente utilizado no tratamento dos afetados. A ASNase catalisa a hidrólise do aminoácido L-asparagina (Asn), presente na corrente sanguínea, a ausência do aminoácido no meio extracelular leva à morte células leucêmicas, que necessitam deste aminoácido para as funções celulares. Fatores envolvendo a eficiência do tratamento com ASNase como reações adversas e curta meia-vida, principalmente devido ao reconhecimento pelo sistema imune e degradação por proteases, limitam a sua eficácia. A encapsulação da enzima em lipossomas pode conferir proteção à degradação, melhorar seu perfil farmacocinético e diminuir os efeitos adversos, de forma a melhorar o tratamento da LLA sendo este o objetivo desse trabalho. Lipossomas de DOPC (1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocolina) e DMPC (1,2-dimiristoil-snglicero-3-fosfocolina) foram desenvolvidos empregando-se o método de hidratação do filme lipídico e diferentes protocolos de preparo contendo ou não diferentes concentrações de 18:0 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polietilenogicol)-2000] (DSPE-PEG). Os lipossomas produzidos foram utilizados para encapsular a ASNase e os sistemas contendo ou não ASNase encapsulada foram caracterizados por espalhamento de luz dinâmico (DLS), potencial zeta, microscopia eletrônica de transmissão (MET) e criomicroscopia de transmissão. Adicionalmente, foram avaliados a taxa de encapsulação e o perfil de permeabilidade das vesículas à L-asparagina. As análises de DLS mostraram que as nanoestruturas formadas empregando-se agitação magnética a partir de sistemas contendo 10% e 20% de DSPE-PEG possuem diâmetro hidrodinâmico menor (~ 25 nm a 60 nm) que os mesmos sistemas sem o fosfolipídio peguilado (~190 nm a 222 nm), demonstrando a relação entre a diminuição do tamanho e o aumento da quantidade de fosfolipídio peguilado e possível formação de estruturas micelares ou bicelares. O emprego de agitação em vórtex para hidratação do filme lipídico, adição do antioxidante -tocoferol e redução da concentração de DSPE-PEG (5% e 10%) levou à formação de sistemas com diâmetro hidrodinâmico maior, sendo esse protocolo e concentrações de PEG definidos como padrão. As análises de MET comprovaram a formação de lipossomas com diâmetro hidrodinâmico semelhante ao observado por DLS; com a utilização da criomicroscopia foi possível observar os lipossomas sem deformações. Os lipossomas de DMPC/DSPE-PEG 10% apresentaram maior permeabilidade à L-asparagina ao longo do tempo e, portanto, poderiam funcionar como nanoreatores, depletando o aminoácido da circulação. Estudos in vitro com células tumorais devem ser realizados e em seguida estudos in vivo, para confirmar este potencial


L-asparaginase (ASNase) is a first-choice drug, combined with other drugs, in therapeutic schemes to treat Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) in children and adolescents. ASNase catalyzes the hydrolysis of L-asparagine (Asn) in the bloodstream; since ALL cells cannot synthesize this amino acid, protein synthesis is impaired leading to leukemic cells death by apoptosis. In spite of its therapeutic importance, treatment with ASNase is associated to side effects, mainly hypersensitivity and immunogenicity. Another drawback refers to degradation by plasma proteases that altogether with immunogenicity shortens the enzyme half-life. Encapsulation of ASNase in liposomes, vesicular nanostructures formed by the self-aggregation of phospholipids, is an attractive alternative that possibly will protect the enzyme from plasma proteases, resulting on better pharmacokinetics profile. In this work, we prepared by thin film hydration liposomal formulations of the phospholipid 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DOPC) or 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3- phosphocholine (DMPC) containing or not different concentrations of 18:0 1,2-distearoyl-snglycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000] (DSPE-PEG), and encapsulated ASNase by electroporation. The systems containing or not ASNase were analyzed by Dynamic Light Scattering, zeta potential and Electron Microscopy. The encapsulation efficiency and vesicles permeability were also evaluated. According to the DLS analysis, the nanostructures formed by film hydration under magnetic stirring employing 10% or 20% DSPE-PEG presented smaller hydrodynamic diameter (~ 25 nm to 60 nm) than the same systems without the pegylated phospholipid (~ 190 nm to 222 nm), demonstrating the relation between size and the amount of pegylated phospholipid that results in formation of micellar or bicellar structures. The protocol was stabilize by hydration of the lipid film under vortex agitation, addition of the antioxidant - tocopherol and reduction of the concentration of DSPE-PEG (5% and 10%), what altogether led to the formation of nanostructures of higher hydrodynamic diameter and monodisperse systems. TEM analyzes confirmed the formation of liposomes with hydrodynamic diameter similar to that observed by DLS; with the use of cryomicroscopy it was possible to observe the liposomes without deformations. Liposomes of DMPC/DSPE-PEG 10% showed permeability to L-asparagine over time and, therefore, could function as nanoreactors, depleting the circulating amino acid


Subject(s)
Asparaginase/pharmacology , Liposomes/analysis , Asparagine/antagonists & inhibitors , In Vitro Techniques/instrumentation , Pharmaceutical Preparations/analysis , Microscopy, Electron/methods , Microscopy, Electron, Transmission/methods , Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma/pathology , Antioxidants/adverse effects
13.
Int. j. morphol ; 39(6): 1709-1718, dic. 2021. ilus
Article in English | LILACS | ID: biblio-1385520

ABSTRACT

SUMMARY: Studies have shown the adverse effects of epileptic seizures on reproductive health. The aim of the present study was to investigate morphological changes, apoptosis and GABA localization in the testis tissue of genetic absence epilepsy rats. Testis tissues of GAERS and Wistar rats were processed for paraffin embedding and electron microscopy. Sections were stained with hematoxylin and eosin, Masson's trichrome and periodic acid-Schiff reaction. GABA immunohistochemistry was applied for determining the alterations in GABA levels. GABA immunoreactivity was observed in the seminiferous tubules and interstitial areas of both GAERS and Wistar rats. GABA immunoreactivity was found to be decreased in GAERS compared to Wistar group. Electron microscopic observations showed that GABA was present in manchette microtubules, sperm tail and neck at different phases of spermiogenesis. Qualitative observations revealed that testis tissues of GAERS showed reduced sperm in the seminiferous tubules compared to the Wistar controls. In conclusion, we demonstrated GABAergic system in the seminiferous tubules of control and GAERS rats, in parallel with the previous studies; and there were alterations in this system in GAERS. We suggest that these alterations in absence epilepsy may also affect the gonadal system, resulting in decreased sperm production.


RESUMEN: Los estudios han demostrado los efectos adversos de las convulsiones epilépticas sobre la salud reproductiva. El objetivo del presente estudio fue investigar los cambios morfológicos, la apoptosis y la localización de GABA en el tejido testicular de ratas con epilepsia de ausencia genética. Se procesaron tejidos testiculares de ratas GAERS y Wistar para inclusión en parafina y microscopía electrónica. Las secciones se tiñeron con hematoxilina y eosina, tricrómico de Masson y reacción de ácido peryódico de Schiff. Se aplicó inmunohistoquímica de GABA para determinar las alteraciones en los niveles de GABA. Se observó inmunorreactividad de GABA en los túbulos seminíferos y las áreas intersticiales de las ratas GAERS y Wistar. Se encontró que la inmunorreactividad de GABA estaba disminuida en GAERS en comparación con el grupo Wistar. Las observaciones microscópicas electrónicas mostraron que GABA estaba presente en los microtúbulos, la cola y el cuello del espermatozoide en diferentes fases de la espermiogénesis. Las observaciones cualitativas revelaron que los tejidos testiculares de GAERS mostraron una reducción de los espermatozoides en los túbulos seminíferos en comparación con los controles Wistar. En conclusión, demostramos el sistema GABAérgico en los túbulos seminíferos de ratas control y GAERS, en paralelo con estudios previos; y además se observaron alteraciones en este sistema en GAERS. Sugerimos que estas alteraciones en epilepisa de ausencia genética también pueden afectar el sistema gonadal, resultando en una disminución de la producción de semen.


Subject(s)
Animals , Pregnancy , Rats , Testis/metabolism , Epilepsy, Absence , gamma-Aminobutyric Acid/metabolism , Testis/ultrastructure , Immunohistochemistry , Microscopy, Electron , Rats, Wistar
14.
Rev. cuba. invest. bioméd ; 40(3)sept. 2021. ilus, tab
Article in Spanish | LILACS, CUMED | ID: biblio-1408558

ABSTRACT

Introducción: Desde hace 20 años se presenta en Centroamérica una enfermedad renal crónica que fundamentalmente afecta a hombres agricultores y no asociada a las causas tradicionales. Se caracteriza por presentar una nefritis intersticial crónica, en tanto las características ultraestructurales no se conocen con exactitud. En su origen se invoca el uso de agroquímicos y otros agentes nefrotóxicos, la deshidratación crónica, el consumo de medicamentos, entre otros factores. Objetivo: Describir las características ultraestructurales de la nefritis intersticial crónica en comunidades agrícolas. Método: Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal. Se estudiaron muestras de biopsias renales de ocho pacientes con diagnóstico de nefritis intersticial crónica de las comunidades agrícolas. Resultados: De los ocho pacientes estudiados, dos (25 por ciento) trabajaban en labores agrícolas y cinco eran del sexo femenino (62,5 por ciento). Dos de los pacientes (25 por ciento) presentaban una enfermedad renal crónica estadio 2, y seis (75 por ciento) estadio 3. En cinco pacientes se hallaron fagolisosomas con presencia de componente lipídico entremezclado con material electrodenso en células del túbulo distal. En igual cantidad de pacientes se observaron cuerpos mieloides con zonas laminadas y núcleo central en células de túbulo proximal y de los vasos sanguíneos. Conclusiones: En pacientes de comunidades agrícolas que padecen nefritis intersticial crónica se evidencian fagolisosomas y estructuras mieloides en túbulos y vasos renales, cuyo contenido y origen se desconocen(AU)


Introduction: Chronic kidney disease mainly affecting male farmers and not associated to traditional causes has been present in Central America for twenty years. The condition is characterized by the presence of chronic interstitial nephritis, but its ultrastructural features are not fully known. Factors suggested as responsible for its occurrence include the use of agrochemicals and other nephrotoxic agents, chronic dehydration and medicine consumption. Objective: Describe the ultrastructural characteristics of chronic interstitial nephritis in farming communities. Method: A cross-sectional descriptive study was conducted of renal biopsy samples from eight patients diagnosed with chronic interstitial nephritis in farming communities. Results: Of the eight patients studied, two (25 percent) were farm workers and five (62.5percent) were female. Two of the patients (25 percent) had stage 2 and six (75 percent) stage 3 chronic kidney disease. In five patients evidence was found of phagolysosomes with lipid component mixed with electrodense material in distal tubule cells. An equal number of patients had myeloid bodies with laminated areas and central nucleus in proximal tubule and blood vessel cells. Conclusions: Evidence of phagolysosomes and myeloid structures of unknown content and origin was found in renal tubules and vessels of patients from farming communities diagnosed with chronic interstitial nephritis(AU)


Subject(s)
Humans , Female , Middle Aged , Phagosomes , Microscopy, Electron/methods , Renal Insufficiency, Chronic/pathology , Chronic Kidney Diseases of Uncertain Etiology/pathology , Epidemiology, Descriptive , Cross-Sectional Studies
15.
Int. j. morphol ; 39(2): 407-415, abr. 2021. ilus, graf
Article in English | LILACS | ID: biblio-1385337

ABSTRACT

SUMMARY: Amiodarone (AMD), an orally powerful antidysrhythmic medication that has caused hepatotoxicity on long-term administration, is commonly used across the world. Silymarin ameliorative effects (SLM); this research elucidated the magnitude of the damage to the liver tissue in AMD. We divided 24 albino rats evenly into four groups given daily doses by gastric tube for eight weeks as follows; the 1st group acted as a control group; the 2nd group received SLM; the 3rd group received AMD; and the 4th group received AMD parallel to SLM. Liver tissues prepared for light, electron microscopic and serum samples screened for biomarkers (I)liver injury enzymes, alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST); (II) oxidative and antioxidant stress, malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD); and (III) inflammatory markers, tumor necrosis factor-alpha (TNF-a) and interleukin-6 (IL-6). The findings showed that AMD caused hepatic histological changes that included congestion of the blood vessels, leucocytic infiltration and cytoplasmic vacuolation. Ultrastructural degeneration of the mitochondria, endoplasmic reticulum swelling, nuclear pyknosis and increased fat droplets and lysosomes were observed. The biochemical findings showed an increase in the AMD group's ALT and AST activities. The group of rats treated with AMD and SLM, increased the improvements in histology and ultrastructure, while the ALT and AST levels were reduced. Our findings collectively agreed that SLM has a protective impact on AMD hepatotoxicity which can be due to its antioxidant properties.


RESUMEN: La amiodarona (AMD) es un fuerte medicamento antiarrítmico administrado por vía oral que ha causado hepatotoxicidad en la administración a largo plazo utilizado con frecuencia en todo el mundo. Efectos de mejora de la silimarina (SLM); esta investigación analizó la magnitud del daño al tejido hepático en la DMAE. Dividimos 24 ratas albinas de manera uniforme en cuatro grupos que recibieron dosis diarias por sonda gástrica durante ocho semanas de la siguiente manera; el primer grupo fue designado como grupo control; el segundo grupo recibió SLM; el tercer grupo recibió AMD; y el cuarto grupo recibió AMD en paralelo a SLM. Se prepararon tejidos hepáticos para muestras de suero, microscopía de luz y electrónica y se analizaron para biomarcadores (I) enzimas de daño hepático, alanina aminotransferasa (ALT) y aspartato aminotransferasa (AST); (II) estrés oxidativo y antioxidante, malondialdehído (MDA) y superóxido dismutasa (SOD); y (III) marcadores inflamatorios, factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) e interleucina-6 (IL-6). Los hallazgos mostraron que la DMAE genera cambios histológicos hepáticos que incluyen congestión de los vasos sanguíneos, infiltración leucocítica y vacuolación citoplásmica. Se observó una degeneración ultraestructural de las mitocondrias, aumento del retículo endoplásmico, picnosis nuclear y aumento de gotitas de grasa y lisosomas. Los hallazgos bioquímicos mostraron un aumento en las actividades de ALT y AST del grupo AMD. El grupo de ratas tratadas con AMD y SLM, aumentó las mejoras en histología y ultraestructura, mientras que se redujeron los niveles de ALT y AST. Nuestros hallazgos coincidieron colectivamente en que SLM tiene un impacto protector sobre la hepatotoxicidad de AMD debido a sus propiedades antioxidantes.


Subject(s)
Animals , Female , Rats , Silymarin/administration & dosage , Protective Agents/administration & dosage , Chemical and Drug Induced Liver Injury/drug therapy , Amiodarone/toxicity , Liver/drug effects , Aspartate Aminotransferases/analysis , Rats, Inbred Strains , Silymarin/pharmacology , Superoxide Dismutase , Microscopy, Electron , Interleukin-6 , Tumor Necrosis Factor-alpha , Oxidative Stress , Protective Agents/pharmacology , Alanine Transaminase/analysis , Liver/enzymology , Liver/ultrastructure , Malondialdehyde , Anti-Arrhythmia Agents/toxicity
16.
Rev. cient. odontol ; 9(1): e43, ene.-mar. 2021. ilus, tab
Article in Spanish | LILACS, LIPECS | ID: biblio-1254247

ABSTRACT

Objetivo: El propósito del presente estudio fue evaluar comparativamente las características de porosidad entre el cemento Portland, MTA Angelus® y Biodentine Septodont®, observados con un microscopio electrónico de barrido. Materiales y métodos: Se prepararon los cementos según las indicaciones del fabricante y se empaquetaron en tubos cilíndricos de polietileno con un diámetro interno de 10 mm y una altura de 5 mm. Se analizó la porosidad de las muestras mediante el microscopio electrónico de barrido. El análisis estadístico se realizó utilizando la prueba Kruskal-Wallis. El nivel de significancia se estableció en 0,05 Resultados: Se observó la descripción de la media de los valores del diámetro de los poros, y el tamaño mayor correspondió al cemento Portland (11,07). Existen diferencias significativas entre las medias del diámetro de los poros con un p = 0,05. Se identificó que el MTA Angelus® tiene la mayor cantidad de poros, le sigue el Biodentine Septodont® y, por último, el Portland. Se comparó la cantidad de poros entre los tres cementos y no se encontraron diferencias significativas, con un p = 0,09. Conclusión: Los análisis realizados en los cementos endodónticos dieron como resultado que el cemento Portland tiene mayor diámetro de poro a diferencia de los otros dos, lo cual implica que tanto el Biodentine Septodont® como el MTA Angelus® tienen mejores propiedades de resistencia y permeabilidad para evitar la microfiltración, y por tanto son mejores para la solución de casos clínicos. (AU)


Objective: The purpose of this study was to compare the porosity characteristics of Portland cement, mineral trioxide aggregate (MTA) Angelus® and Biodentine Septodont® by scanning electron microscopy. Materials and Methods: Cements were prepared according to the manufacturer's instructions and packed in cylindrical polyethylene tubes with an internal diameter of 10 mm and a height of 5 mm. The porosity of the samples was analyzed using scanning electron microscopy. Statistical analyses were performed using the Kruskall Wallis test. The level of significance was established at 0.05. Results: The largest size mean diameter valus was found with Portland cement (11.07). There were significant differences between the mean pore diameters (p = 0.05). MTA Angelus® had the largest number of pores, followed by Biodentine Septodont®, and finally, Portland. There were no significant differences in the pores of the three cements (p = 0.09). Conclusion: The results of this comparative analysis of endodontic cements showed that Portland cement has a larger pore diameter than MTA Angelus® and Biodentine Septodont®, demonstrating that these latter two cements present better resistance and permeability properties, and thereby prevent microleakage. (AU)


Subject(s)
Microscopy, Electron , Porosity , Dental Cements , Epidemiology, Descriptive , Cross-Sectional Studies
17.
Int. j. morphol ; 39(1): 179-185, feb. 2021. ilus
Article in English | LILACS | ID: biblio-1385323

ABSTRACT

SUMMARY: Despite the existence of a large amount of actin in the axons, the concentration F-actin was quite low in the myelinated axons and almost all the F-actin were located in the peripheries of the myelinated axons. Until now, the ultrastructural localization of F-actin has still not been reported in the myelinated axons, probably due to the lack of an appropriate detection method. In the present study, a phalloidin-based FITC-anti-FITC technique was adopted to investigate the subcellular localization of F-actin in the myelinated axons. By using this technique, F-actin is located in the outer and inner collars of myelinated cytoplasm surrounding the intermodal axon, the Schmidt-Lanterman incisures, the paranodal terminal loops and the nodal microvilli. In addition, the satellite cell envelope, which encapsulates the axonal initial segment of the peripheral sensory neuron, was also demonstrated as an F-actin-enriched structure. This study provided a hitherto unreported ultrastructural view of the F-actin in the myelinated axons, which may assist in understanding the unique organization of axonal actin cytoskeleton.


RESUMEN: A pesar de la existencia de una gran cantidad de actina en los axones, la concentración de F-actina era bastante baja en los axones mielinizados y casi la totalidad de F-actina se localizaba en las periferias de los axones mielinizados. A la fecha aún no se ha reportado la localización ultraestructural de F-actina en los axones mielinizados, probablemente debido a la falta de un método de detección apropiado. En el presente estudio, se adoptó una técnica FITC-anti-FITC basada en faloidina para investigar la localización subcelular de F-actina en los axones mielinizados. Mediante el uso de esta técnica, la F-actina se localiza en los collares externo e interno del citoplasma mielinizado que rodea el axón intermodal, a las incisiones de Schmidt-Lanterman,a las asas terminales paranodales y a las microvellosidades nodales. Además, la envoltura de la célula satélite, que encapsula el segmento axonal inicial de la neurona sensorial periférica, también se demostró como una estructura enriquecida con F-actina. Este estudio proporcionó una vista ultraestructural de la F-actina en los axones mielinizados, que puede ayudar a comprender la organización única del citoesqueleto de actina axonal.


Subject(s)
Animals , Female , Rats , Axons/ultrastructure , Actins/ultrastructure , Myelin Sheath/ultrastructure , Microscopy, Electron
18.
Braz. arch. biol. technol ; 64: e21200397, 2021. tab, graf
Article in English | LILACS | ID: biblio-1285557

ABSTRACT

HIGHLIGHTS Brachiaria brizantha proved to be a promising biomass for ethanol production. Fermentation was not impaired by the inhibitors furfural and hydroxymethylfurfural.


Abstract Different lignocellulosic biomasses are found worldwide and each country has its own important industrial crop that can be converted into high-value products, such as ethanol. Therefore, evaluation of new biomasses to be used in biorefineries is important to decrease the dependence on non-renewable resources and to guarantee sustainable development. This work evaluated Brachiaria brizantha, a grass commonly used as animal forage, and the standard biomass for 2G-ethanol, sugarcane bagasse. The chemical compositions of both biomasses were determined and different times and temperature of acid pretreatment were tested. Morphological analysis via scanning electron microscopy showed more deconstructed fibers after harsher biomass pretreatments. Simultaneous saccharification and fermentation of pretreated Brachiaria brizantha presented higher efficiency than when using sugarcane bagasse as the carbon source. A biomass conversion of 46 % was achieved when Brachiaria brizantha grass was pretreated with 2% sulfuric acid for 60 minutes. Moreover, fermentation was not impaired by the inhibitors furfural and hydroxymethylfurfural. It was concluded that Brachiaria brizantha is a promising biomass for ethanol production.


Subject(s)
Biomass , Brachiaria/chemistry , Saccharum/chemistry , Ethanol , Microscopy, Electron/instrumentation
19.
Frontiers of Medicine ; (4): 933-937, 2021.
Article in English | WPRIM | ID: wpr-922509

ABSTRACT

Neurofibromatosis (NF) is a genetic disease in which the lungs are rarely involved. However, in NF cases with lung involvement, chest computed tomography may show bilateral basal reticulations, apical bullae, and cysts without bronchiectasis. Herein, we report a patient diagnosed with NF on the basis of the results of genetic testing who presented with early-onset wet cough and bronchiectasis. Considering the differential diagnosis of bronchiectasis combined with his early-onset wet cough, sinusitis, and sperm quality decline, we considered the possibility of primary ciliary dyskinesia (PCD). Further electron microscopy analysis of cilia and identification of homozygous mutations in the RSPH4A gene confirmed the diagnosis of PCD. Therefore, for patients with NF, when an image change exists in the lungs that does not correspond to NF, the possibility of other diagnoses, including PCD, must be considered.


Subject(s)
Humans , Cilia , Kartagener Syndrome/genetics , Microscopy, Electron , Mutation , Neurofibromatosis 1/genetics
20.
Int. j. morphol ; 38(6): 1786-1796, Dec. 2020. graf
Article in English | LILACS | ID: biblio-1134512

ABSTRACT

SUMMARY: Bisphenol A (BPA) is an industrial chemical widely used to make polycarbonate plastics for packaging and epoxy resins. This study sought to examine how selenium (Se) affects BPA toxicity in terms of albino rats' histological structure, antioxidant enzymes and reproductive organs (seminiferous tubules). Twenty-four adult male rats were divided into four experimental groups: Group 1: Control; Group 2: Orally administered BPA; Group 3: Orally administered sodium selenite; Group 4: Treated daily with BPA followed by selenium (Se). All experiment done for 4 weeks. BPA exposure caused changes in the testicular histological structure, which consists apoptosis, and led to changes in several biochemical markers: Malondialdehyde, catalase, superoxide dismutase, and glutathione peroxidase. However, these BPA side effects may be ameliorated in rats treated with BPA-plus-Se. These protective effects of Se may attributable to its ability to remove potentially damaging oxidizing agents in living organisms. The results may confirm that Se countered the oxidant effects and increased the BPA-induced stress response in rats. So, Se promotes the healthy growth and development of mammals by protecting them from oxidative stress. As human are greatly exposed to BPA and it can accumulate in tissues, there is concern about human reproductive functions particularly for occupational workers exposed usually to greater levels of BPA. Thus, the use of BPA in multiple industries must be restricted and the inaccurate usage of plastic containers should be avoided to decrease the health hazards. Administration of Se may protect against the adverse effects of BPA on reproductive functions and structures.


RESUMEN: El bisfenol A (BPA) es un químico industrial ampliamente utilizado para fabricar plásticos de policarbonato para envases y resinas epoxi. Este estudio examinó el efecto de selenio (Se) en la toxicidad del BPA en términos de la estructura histológica, enzimas antioxidantes y los órganos reproductivos (túbulos seminíferos) de ratas albinas. Se dividieron veinticuatro ratas macho adultas en cuatro grupos experimentales: Grupo 1: control; Grupo 2: BPA administrado por vía oral; Grupo 3: BPA administrado por vía oral para; Grupo 4: tratado diariamente con BPA seguido de selenio (Se). El experimento se realizó durante cuatro semanas y se observó que la exposición al BPA provocó cambios en la estructura histológica testicular, incluyendo apoptosis, y alteraciones en varios marcadores bioquímicos:malondialdehído, catalasa, superóxido dismutasa y glutatión peroxidasa. Sin embargo, estos efectos secundarios del BPA pueden mejorar en ratas tratadas con BPA-plus-Se. Estos efectos protectores del Se pueden ser atribuidos a la capacidad de eliminar agentes oxidantes potencialmente dañinos en organismos vivos. Los resultados indicaron que se contrarrestaron los efectos oxidantes y aumentó la respuesta al estrés inducido por BPA en ratas, y favorece el crecimiento y desarrollo en los mamíferos al protegerlos del estrés oxidativo. Debido a la exposición al BPA en el ser humano, se puede acumular en los tejidos, por lo que existe una preocupación por el daño a las funciones reproductivas en particular de los trabajadores que generalmente están expuestos a niveles más altos de BPA. Por lo tanto, se debe restringir el uso de BPA en las industrias y evitar el uso incorrecto de envases de plástico para así disminuir los riesgos para la salud. La administración correcta de Se puede proteger contra los efectos adversos del BPA en las funciones y estructuras reproductivas.


Subject(s)
Animals , Male , Rats , Phenols/toxicity , Selenium/pharmacology , Testis/drug effects , Benzhydryl Compounds/toxicity , Antioxidants/pharmacology , Phenols/administration & dosage , Superoxide Dismutase/drug effects , Testis/pathology , Benzhydryl Compounds/administration & dosage , Microscopy, Electron , Biomarkers , Catalase/drug effects , Administration, Oral , Apoptosis/drug effects , Oxidative Stress , Glutathione Peroxidase/drug effects
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